高效液相色谱法测定维生素ＡＤ滴剂中维生素Ｅ的含量

　　维生素AD滴剂中添加的维生素E(Vit-E)含量可直接影响其药效和功能，故测定维生素 AD滴剂中的 Vit-E含量有利于维生素AD滴剂的质量控制;然而，目前婴幼儿用维生素AD滴剂中Vit-E的含量测定尚未见文献报道。2013年4～5月笔者采用高效液相色谱法(HPLC)测定样品中 Vit-E的含量，并进行了 Vit-E含量测定的方法学研究，旨在为实际应用提供支持。

　　1　材料与方法

　　1.1　仪器、试剂及待测样品

　　(1)仪器：Waters高效液相色谱仪(配有1525型液相色谱泵和2996型二极管阵列监测器);AL204电子天平(上海梅特勒-托利多有限公司)。

　　(2)试剂：甲醇(色谱纯);乙腈(色谱纯);二氯甲烷(分析纯);Vit-E对照品(购自中国食品药品检定研究院)。

　　(3)待测样品：伊可新维生素AD滴剂(山东达因海洋生物制药股份有限公司)、维得小丸子维生素AD软胶囊(江西海天药业股份有限公司)、贝特令维生素AD滴剂(浙江海力生制药有限公司)、呗咖维生素AD滴剂(青岛双鲸药业有限公司)、斯状贝贝维生素AD滴剂(烟台元生药业有限公司)，均购自药品商店。

　　1.2　方法　采用高效液相色谱法。

　　(1)混合溶剂配制：将甲醇、乙腈、二氯甲烷按体积比为1∶1∶1配成混合溶剂，待用。

　　(2)确定色谱条件：选用 Kromasil　C18(250mm×4.6mm　i.d，5μm)色谱柱、甲醇为流动相，设定流速为1.0ml/min、柱温为室温、检测波长为292nm、进样量为5μl。

　　(3)Vit-E标准曲线绘制：精密称取 Vit-E对照品61.8mg，用混合溶剂溶解并定容于10ml容量瓶中，再用0.45μm微孔滤膜过滤得Vit-E储备液;精密移取0.1、0.4、0.7、1.0、1.2、1.4ml储备液于10ml容量瓶中，用混合溶剂溶解定容后测定其峰面积，以质量浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标绘制标准曲线。

　　(4)样品的测定：取维生素AD滴丸1粒，剪开胶囊，取其中油状液体置于10ml容量瓶中并精密称重，用混合溶剂溶解后定容，再用0.45μm微孔滤膜过滤后应用HPLC测定。

　　2　结果

　　2.1　线性范围与最低检出限　按Vit-E标准曲线绘制步骤得到的回归方程为：A=169287c+640.19，r=0.9998(n=6)，表明Vit-E浓度在6.18～86.52μg/ml范围内时，其与峰面积呈良好的线性关系;以信噪比(S/N)为3时，得出该检测方法的最低检出限为0.031μg/ml，说明该方法灵敏度较高。

　　2.2　精密度实验情况　按样品测定步骤对同一样品重复测定6次，根据标准曲线得出 Vit-E含量，计算相对标准偏差RSD为0.473%，说明实验精密度良好。

　　2.3　回收率实验情况　精密称取伊可新维生素AD滴丸待测样品3份，再分别加入 Vit-E对照品，按样品测定步骤测定并根据标准曲线得出Vit-E含量;计算出回收率为100.10%～106.88%，说明实验回收率较高。

　　2.4　稳定性实验情况　准确称取伊可新维生素AD滴丸待测样品0.3100g置于10ml容量瓶中，用混合溶剂溶解后定容;按样品测定步骤每间隔1h测定Vit-E含量1次、连续测定6次，结果分别为0.494、0.498、0.502、0.499、0.492、0.497mg/g，表明样品中Vit-E含量在6h内稳定。

　　2.5　样品测定结果　按样品测定步骤分别对5种维生素AD滴丸待测样品进行测定，结果表明该方法可应用实际检测工作中。

　　3　讨论

　　由于维生素E和维生素A被生物体吸收时具有相互作用，故维生素 AD滴剂中的维生素 E含量可对其药用效果起到一定的影响作用。本文建立了 HPLC测定维生素 AD滴剂中维生素E含量的方法，结果显示本法操作简单、样品处理快速、结果准确、灵敏度高，可用于药品维生素 AD滴剂的质量监测。